[STUDI] Sangamo: CD4 e staminali resi CCR5- mediante ZFN II

[Dora]

Comunicato stampa appena pubblicato. Ora non ho il tempo per studiarmelo bene, per confrontarlo con i dati del Trenton Patient (quello che ha sospeso la terapia dopo l'infusione dei CD4 modificati e controllato da solo la viremia) e per capire se i pazienti che hanno sospeso la ART siano nuovi o sempre gli stessi, ma parrebbe che un certo controllo sulle viremie ci sia stato.


Sangamo BioSciences Presents Clinical Data Demonstrating HIV Reservoir Reduction in HIV-Infected Subjects Treated with ZFP Therapeutic ®, SB-728-T

Unprecedented Immune Reconstitution Drives HIV Viral Reservoir Depletion --Encouraging Preliminary Anti-Viral HIV Data during Treatment Interruption in Ongoing SB-728-T Phase 2 Trials

RICHMOND, Calif., May 15, 2013 /PRNewswire via COMTEX/ -- Sangamo BioSciences, Inc. SGMO +2.59% announced today the presentation of new clinical data from its program to develop a ZFP Therapeutic ® for HIV/AIDS. The data, which demonstrate that SB-728-T treatment results in a reduction in the HIV reservoir in HIV-infected subjects, are being presented at the 16th Annual Meeting of the American Society of Gene and Cell Therapy (ASGCT). The meeting is being held in Salt Lake City from May 15-18, 2013.

HIV-infected subjects enrolled in Sangamo's ongoing SB-728-902 clinical trial (Cohorts 1-3) received a single infusion of SB-728-T which resulted in a durable increase in total CD4 T-cells driven by increased ZFN-modified CD4 central memory T-cells. The extent of exposure of subjects to circulating zinc finger nuclease (ZFN) CCR5 protected CD4 T cells correlated with a long term decrease in the peripheral blood mononuclear cell (PBMC) HIV reservoir as measured by proviral DNA. In addition, two of four evaluable subjects in Cohort 5 of this study showed a decrease of greater than one log in their viral load during a sixteen week treatment interruption (TI) with one of the subjects achieving a transiently undetectable viral load during the TI period. In subjects in which viral load decreased, a measureable anti-HIV response was observed, specifically a multi-functional response of CD8 T-cells to elements of HIV core proteins.

"These data are quite remarkable," commented Dale Ando, M.D., Sangamo's vice president of therapeutic development and chief medical officer. "In previous clinical studies, a decline in the HIV reservoir has never been observed in subjects on long-term anti-retroviral therapy (ART) and any increase in the levels of CD4 cells in HIV-infected subjects is often associated with a concomitant increase in the size of the reservoir. In contrast, a single SB-728-T treatment of subjects on long-term ART produced a significant and durable improvement in CD4 count and, in the majority of subjects, a notable decrease in the HIV reservoir over time. An observed correlation with circulating ZFN CCR5 protected CD4 cells is extremely promising."

Summary of Clinical Data

SB-728-0902 Cohorts 1-3 in Immunologic Non-Responders (INR)

-- Treatment of HIV subjects with a single infusion of SB-728-T leads to long term increases in CD4 counts (up to 3 years in some subjects).

-- Long-term increases in CD4 counts correlate with increased CD4 central memory and increased ZFN CCR5 protected central memory T-cells.

-- The extent of long-term exposure to circulating ZFN-CCR5 protected CD4 cells correlates with long-term decreases in the PBMC HIV reservoir.

SB-728-0902 Cohort 5 (CCR5 delta-32 Heterozygotes)

-- Post SB-728-T infusion, a 16-week ART TI can lead to viral load reduction from initial peak.

-- Two out of four subjects showed reduction in viral load during TI

-- One subject achieved transient undetectable viral load during TI

-- The best viral load reduction responses are seen in subjects with CD8 T-cell HIV gag immune responses that are polyfunctional (expression of multiple cytokines) and the highest levels of bi-allelic modification of the CCR5 gene.

SB-728-1101 Immunologic Responders with Cytoxan Conditioning

-- Accrual and treatment in progress with ten subjects infused to date.

-- Analysis of numbers of modified SB-728-T cells and viral load during TI is in progress.

Viral load decreases correlate with highest levels of estimated biallelic CCR5 modification

-- Decreases in viral load from peak to the end of TI correlated with mean circulating bi-allelic ZFN CCR5 protected CD4 cells during the TI for all patients to date who fully completed TI per protocol in SB-728-Penn, 902 Cohort 5(CCR5 delta-32 Heterozygotes) and 1101 studies.

"These data continue to demonstrate the important link between SB-728-T-driven immune reconstitution and HIV viral load depletion," said Rafick-Pierre Sekaly, Ph.D., Co-Director & Chief Scientific Officer, The Vaccine & Gene Therapy Institute of Florida (VGTI Florida), whose laboratory carried out the immunologic analyses. "Specifically, SB-728-T treatment protects long-term central memory CD4 T-cells from HIV-infection which is key for the successful development of an immunologic approach to HIV. ZFN-protected central memory cells are driving positive effects on total CD4 T-cell counts in treated subjects and appear to also play a role in breaking the cycle of HIV reservoir maintenance. "

"We are very encouraged by our data to date and by our continued progress in understanding the factors required to maximize the potential of this novel immunologic approach to a functional cure for HIV," stated Geoff Nichol, M.B., Ch.B., Sangamo's executive vice president of research and development. "Sangamo has demonstrated that we have the necessary factors for success: SB-728-T is well-tolerated; the modified cells engraft and traffic throughout the body, appear to be immunologically active, and importantly, persist.

We observe an unprecedented increase in total CD T-cell levels which correlates with the levels of ZFN-protected CD4 central memory T-cells, and a related long-term decrease in the viral reservoir. We have also observed reduction in viral loads during TI, to undetectable levels transiently in one of four subjects, providing a second example of this observation. Viral load changes during TI continue to correlate with circulating bi-allelic ZFN CCR protected CD4 cells. In addition, we have identified key immunologic markers of inflammation that correlate with the degree of engraftment and can potentially aid in the selection of subjects for which SB-728-T may be most effective."

Dr. Nichol continued, "In our ongoing studies, we will continue to investigate these parameters including the threshold engraftment levels of biallelically modified T-cells and the types of HIV-reactive cells necessary to mount an immune response to the virus. We look forward to presenting the results of these completed studies at the end of 2013."

The data were presented today by Dale Ando, M.D., Sangamo's vice president of therapeutic development and chief medical officer in a Scientific Symposium entitled "Challenges and Success of Gene Therapy Product Approval." Dr. Ando also chaired the symposium.

Data will also be presented from Sangamo's Phase 1 clinical trial SB-728-902 Cohorts 1-3 in a second presentation at 2:15 pm MT, on Thursday, May 16, 2013, Abst.#: 58 "Long Term CD4 Reconstitution in HIV Subjects Receiving ZFN CCR5 Modified CD4 T-Cells (SB-728-T) May Be Attributed to the Sustained Durability of the Central Memory T-Cell Subset."

Summary of Clinical Trial Design About SB-728-902 Cohorts 1-3 The study is an open-label Phase 1 clinical trial to evaluate the safety and tolerability of single infusions of an escalating dose of an autologous (a patient's own) CD4+ T-cell product genetically modified at the CCR5 gene by CCR5-specific ZFNs (SB-728-T). The trial enrolled nine HIV-infected subjects (three cohorts of three subjects each) who have sub-optimal T-cell levels and no detectable viral load on long-term ART. Subjects remained on their existing antiviral therapy while receiving treatment with SB-728-T.

About SB-728-902 Cohort 5 Up to 20 HIV-infected subjects heterozygous for the CCR5 delta-32 mutation (i.e. with one CCR5 gene that is naturally modified) who are currently on ART are being enrolled and will receive a single intravenous infusion of SB-728-T (5 to 30 billion modified cells). Two months after SB-728-T treatment, subjects undergo a 16 week TI during which time their anti-retroviral therapy is discontinued. ART will be reinstituted in subjects whose CD4 T-cell counts drop to <350 cells/ mm3 and/or whose HIV-RNA increases to >100,000 /mL for three consecutive weekly measurements. At the end of the TI, subjects with a sustained detectable HIV viral load are reinstituted on ART. Subjects with an undetectable viral load can remain off ART until HIV RNA levels are detectable or their CD4 T-cell count drops below 350 cell/mm3 for three consecutive weekly measurements.

About SB-728-1101 SB-728-1101 is an open-label, dose escalation, multi-center study designed primarily to evaluate the safety and tolerability of escalating doses of cyclophosphamide (Cytoxan) administered one day prior to SB-728-T infusion. Cytoxan is a drug that is used to transiently reduce the numbers of T-cells in the body which then rapidly repopulate once the drug is discontinued. Such lymphodepletive treatment has been used to enhance engraftment of adoptively transferred T-cells in the treatment of cancer and as therapy for numerous autoimmune diseases. The drug has been previously used in HIV-infected individuals and studies demonstrate that, while the drug was transiently lymphodepleting, it did not significantly reduce total CD4 T-cell counts over the long term and was adequately tolerated.

In addition to safety, the study is evaluating the effect of escalating doses of Cytoxan on SB-728-T engraftment, the effect of SB-728-T treatment on viral load following ART interruption, the change in CD4+ T-cell counts in peripheral blood and the long-term persistence of SB-728-T.

At least 9 HIV-infected subjects on ART are being enrolled into 3 dose-escalating cohorts (3 subjects/cohort), and will receive intravenous Cytoxan (200 mg, 500 mg/m2 or 1000 mg/m2). Within each cohort, treatment is staggered so that each subsequent subject cannot be infused with Cytoxan until at least 2 weeks after the preceding subject. One day after receiving Cytoxan, subjects are infused with SB-728-T (5 to 30 billion cells). Six weeks after SB-728-T infusion, subjects with CD4 cell counts greater-than or equal to 500 cells/ mm3undergo a 16 week TI during which time their anti-retroviral therapy is discontinued. ART will be reinstituted in subjects whose CD4 T-cell counts drop to <500 cells/mm3and/or whose HIV-RNA increases to >100,000 copies/ mL for three consecutive weekly measurements. At the end of the TI, subjects with a sustained detectable viral load or CD4 T-cell count <500 cells/ mm3are reinstituted on ART. Subjects with an undetectable viral load can remain off ART until HIV RNA levels are detectable or their CD4 T-cell count drops below 500 cells/mm3 for three consecutive weekly measurements. (...)

[Boyz84]

Dora attendiamo impazienti il tuo approfondimento...
Così è troppo complicato

[Dora]

Dora attendiamo impazienti il tuo approfondimento...
Così è troppo complicato

Domani in giornata, se riesco. Sennò venerdì, va bene?
Devo controllare i dati sulle viremie dopo l'interruzione della ART che Sangamo ha presentato un anno e mezzo fa. Non ho capito se c'è o no una vera novità.

[Dora]

Dora attendiamo impazienti il tuo approfondimento...
Così è troppo complicato

Domani in giornata, se riesco. Sennò venerdì, va bene?
Devo controllare i dati sulle viremie dopo l'interruzione della ART che Sangamo ha presentato un anno e mezzo fa. Non ho capito se c'è o no una vera novità.

Sto ripercorrendo le diverse fasi di questa ricerca a partire dal settembre 2011, quando per la prima volta venimmo a conoscenza del "Trenton patient" - un eterozigote Delta32 che, dopo un'infusione di CD4 modificati, sospese la ART e mantenne la viremia irrilevabile finché - in termini di protocollo - dovette riassumere la terapia.
Ho il forte sospetto che Sangamo ieri non ci abbia detto molto che già non sapessimo e abbia semplicemente riproposto o al più lievemente ampliato dei dati già raccontati fra l'ICAAC del settembre 2011 e il CROI del marzo 2012 (da allora, di viremie si erano ben guardati dal parlare).
Ha comunque fornito il risultato dell'interruzione della ART in 4 persone eterozigoti Delta32 e sono riuscita a trovare le slides. Quello che ancora non mi è chiaro è se questi 4 siano in più rispetto ai 4 di cui ci era stato detto qualcosa.
In ogni caso, durante le interruzioni terapeutiche si sono visti risultati estremamente variabili:

• 1) una viremia transitoriamente irrilevabile;
  2) una riduzione della viremia;
  3) una rapida ripresa della ART a causa di un balzo in alto della viremia;
  4) nessuna riduzione della viremia.

Per quanto riguarda la ricostituzione immunitaria - che costituisce il più netto successo di tutte queste sperimentazioni - i dati di cui tenere conto sono quelli presentati al CROI lo scorso marzo.
Del trial con la ciclofosfamide, che ha l'obiettivo di ricreare "artificialmente" il beneficio dell'essere per natura eterozigoti Delta32 "facendo spazio" nel midollo con la distruzione mirata di tanti linfociti T, ancora di dati consistenti non se ne hanno.

Spero al più presto di riuscire a scrivere un post più argomentato, ma ho qualche giornata complicata e, se i miei sospetti hanno una ragion d'essere, anche l'urgenza del post viene meno.

[Dora]

La questione cruciale della metodica Sangamo di distruzione del gene che codifica per il corecettore CCR5 sui CD4 è se l’infusione di questi CD4 non suscettibili di essere infettati mette i pazienti in grado di controllare da soli la viremia, una volta sospesa la ART. Cioè, perché l’SB-728-T possa davvero portare a una cura funzionale è necessario che dimostri di avere anche un effetto antivirale.
In caso contrario, si tratterebbe di un trattamento che sta solo dimostrando di aumentare abbastanza stabilmente il numero dei CD4 negli immunologic non responders (le persone che mantengono CD4 bassi pur con viremia resa irrilevabile dalla ART). Ovviamente un fantastico risultato, dal momento che ad oggi di aiuti per gli INR non ce ne sono. Non però la cura funzionale per tutti cui Sangamo dice di aspirare.

Provo dunque a riassumere quello che Sangamo ci ha appena detto sull’andamento delle viremie di 4 pazienti che hanno ricevuto un’infusione di CD4 modificati e poi hanno affrontato un’interruzione di terapia.
Ho dovuto controllare i codici di identificazione di questi pazienti, perché in un’altra occasione cruciale Sangamo ebbe la brillante idea di modificare l’ID del “Trenton Patient”, così che, finché non venni a capo del giochetto, rimasi per qualche giorno convinta che di pazienti che avevano sospeso la ART e avevano mantenuto viremia irrilevabile ce n’erano due.
Mi pare di capire che si tratti di pazienti nuovi rispetto a quanto Sangamo raccontò del trial del 2011, quando a ICAAC 2011 sostenne che "a 0.8 to >2.0-log reduction in VL from peak during TI was observed in the 3 of 6 subjects with the highest estimated circulating levels of cells with biallelic modification".
La sperimentazione di cui parliamo oggi ha avuto inizio nel gennaio 2012 e già allora il primo paziente era stato trattato (ricordo che i pazienti vengono trattati uno per volta e non tutti insieme – questa è la ragione di un mortifero allungarsi dei tempi delle sperimentazioni).

Fanno parte del trial SB-728-0902 coorte 5, di persone eterozigoti Δ32, quindi quei pazienti in cui, grazie alla loro favorevole condizione genetica, la procedura di distruzione del gene del CCR5 mediante ZFN dovrebbe comportare la metà del lavoro e forse anche il doppio del successo. Una nicchia, però, data l’esigua prevalenza di questa caratteristica genetica nella popolazione mondiale (dalla tabella riportata sotto, si vede infatti che tutti i pazienti sono caucasici).

In questi pazienti, due mesi dopo l’infusione di CD4 modificati è stata sospesa la ART per 16 settimane. Il protocollo prevedeva che la terapia sarebbe stata ripresa immediatamente se i CD4 fossero scesi sotto le 350 cellule/mm3 e/o l’HIV RNA fosse salito sopra le 100.000 copie/mL durante tre prelievi consecutivi (i controlli previsti sono settimanali). Sempre secondo il protocollo, alla fine delle 16 settimane di sospensione si deve decidere: se le viremie sono “sostenute”, si riprende la ART; se rimangono irrilevabili, i pazienti possono restare in sospensione terapeutica finché i loro CD4 scendono sotto i 350 in tre prelievi settimanali consecutivi (ricordiamo che il “Trenton Patient” – un eterozigote Δ32 - riprese tassativamente la terapia dopo 16 settimane di interruzione anche se la sua viremia era irrilevabile. Quanti CD4 avesse, non lo ricordo, anche se ricordo che di partenza aveva un rapporto CD4/CD8 > 1, un numero assoluto di CD4 non esaltante, sui 370, ma un’ottima percentuale, circa il 34%; allora, però, il protocollo era più rigido).

In una delle slides presentate da Dale Ando all’ASGCT è mostrato l’avanzamento dei lavori in questa coorte di pazienti. I primi quattro (504, 506, 503, 507) sono quelli i cui dati vengono discussi. Per tre, la sospensione terapeutica è ancora in corso, mentre altri tre si sono ritrovati con un rognoso virus dual-tropico (R5/X4), che rischia di vanificare tutta la procedura.




E ora passiamo ai dettagli, che ci spiegano perché, nonostante i toni trionfalistici del comunicato stampa emanato da Richmond, Sangamo si sia trovata con un fastidioso -3,05 in borsa e io con un magone che non accenna a passare.

Il titolo della slide 25 ci dice che il soggetto 504, durante la sospensione della ART, ha mostrato una transitoria viremia irrilevabile. Si tratta del paziente che, fra i quattro, ha fatto meglio.

Ovviamente Sangamo cerca di tirare acqua al suo mulino, ma quello che il grafico ci dice è che in un paio di prelievi fatti a metà del periodo di sospensione la viremia è risultata irrilevabile. Per il resto del tempo, si è quasi sempre mantenuta vicino al set point virale (cioè il livello a cui si stabilizza la viremia in una data persona al termine della fase acuta). Non che la questione del set point debba essere considerata una vacca sacra (vi invito a rileggere un meraviglioso post che Leon scrisse proprio a proposito di questa storia), ma sta di fatto che nel paziente 504 la viremia durante la sospensione ha sempre oscillato attorno al set point, tranne in quel paio di occasioni ravvicinate in cui è sparita sotto la soglia di rilevabilità.




Ed ora veniamo (scendiamo) alla slide 27 e al paziente 506. Il titolo ci dice che c’è stata una riduzione della viremia durante la sospensione. Il grafico ci dice che la sospensione della ART è durata circa un terzo del tempo previsto, che quando la ART è stata sospesa la viremia è balzata a quasi il doppio del set point e poi si è assestata a un livello comunque superiore. Basterebbe questo per capire che tenere il set point viremico come riferimento virtuoso fa acqua da tutte le parti e che le speranze di Sangamo (e nostre) in questo trial forse erano mal riposte.




Di male in peggio, arriviamo alla slide 29, in cui ci si dice fuori dai denti che il paziente 503 ha dovuto riprendere la terapia ben prima del previsto, perché la sua viremia è balzata in alto.




L’ultima slide, la 31, ci parla del fallimento del trattamento, dal punto di vista del controllo della viremia, nel paziente 507: nessuna consistente riduzione dell’HIV RNA, ripresa della ART dopo tre mesi.




Veniamo alle consolazioni (tenendo sempre a mente che il discorso sugli aumenti dei CD4 è tutt’altro che disprezzabile e che non viene inficiato da un problema nel controllare la viremia senza gli antiretrovirali).

Mettendo insieme i pazienti che erano nel trial degli eterozigoti Δ32 e quelli che erano nel trial degli immunologic non responders (trial SB-728-0902 coorti 1-3, di cui sono state ampiamente analizzate al CROI le sottopopolazioni di CD4), si è visto

• • che gli aumenti dei CD4 sono stati consistenti e durevoli;
  • che la lunga durata di questi aumenti si associava a una diminuzione del reservoir dell’HIV nei CD4 - l’ipotesi è che questo sia dovuto alla distruzione del CCR5 nei CD4 memoria centrali;
  • e che le risposte delle viremie si correlano con la quantità di modificazioni bialleliche del CCR5 stimate (questo mi pare che l'avessero già detto nel 2011-12 ed è una delle ragioni per cui sarà molto interessate vedere i risultati del trial con la ciclofosfamide).

Concludo con il poco che è stato detto riguardo alla sperimentazione sul condizionamento con ciclofosfamide (Cytoxan): il trial SB-728-1101, che è stato deciso per tentare di aumentare le possibilità di successo dell’SB-728-T in persone che non hanno la fortuna di essere eterozigoti Δ32.
Questo trial utilizza un approccio già ampiamente adottato in campo oncoematologico e immunologico: quello del condizionamento, cioè della distruzione totale o – come in questo caso – parziale per via chemioterapica delle cellule del midollo osseo deputate alla produzione di cellule del sangue al fine di creare – in vivo – lo spazio che consenta alle cellule modificate e reinfuse di espandersi. L’obiettivo è quello di decuplicare o addirittura centuplicare i CD4 modificati biallelicamente.
Il regime di pre-condizionamento linfopenico prevede un aumento dei dosaggi del farmaco utilizzato, la ciclofosfamide (Cytoxan), che è un chemioterapico che può essere assunto sia per via orale, sia per via parenterale e che viene normalmente usato per diminuire la risposta immunitaria sia in caso di vari tumori, sia in caso di malattie autoimmuni. Si tratta di un farmaco che colpisce, specificamente e in modo transitorio, i linfociti T e insieme segnala ai nuovi CD4 reinfusi che devono moltiplicarsi rapidamente per rimediare alla deplezione dei vecchi.

La slide 35 ci dice come il trial è stato impostato:




La slide 36, invece, ci dice che

• • il condizionamento con Cytoxan nelle prime due coorti si è dimostrato sicuro e ben tollerato, con al più un po’ di nausea;
  • che si è vista una consistente deplezione dei linfociti T dopo la somministrazione del condizionamento e poi una loro normalizzazione;
  • che i CD4 dopo l’infusione dei CD4 modificati sono aumentati;
  • e che il resto dei dati non è ancora stato elaborato.

[skydrake]

Anche Leon, nel suo meraviglioso post, aveva ottenuto una notevole riduzione della viremia, a tal punto da poter essere comparato al paziente 5-04, pur senza alcuna infusione. Riguardo ai rimanenti, é un DISASTRO. Adesso possiamo anche dire che hanno monitorato il parametro sbagliato, il setpoint virale e che non conta in realtà, ma perché emerge solo adesso a posteriori?
Ma sopratutto, e Dora spero che tu mi contraddica, davvero ben tre pazienti su dieci si ritrovano con un virus dual-tropico dopo questa infusione?
Se fosse cosi la Sangamo avrebbe dimostrato che la co-presenza di CD4 con CCR5+ e CCR5- rappresenta il luogo di coltura ideale per indurre lo switch verso il tropismo X4. Anche se, per assurdo, tutti i pazienti R5 tropici si ritrovassero con un set point virale nullo, ne conseguirebbe comunque che il periodo di compresenza andrebbe ridotto il più possibile, esigenza incompatibile l'approccio della Sangamo, che puntava nella lenta sostituzione dei CD4.

[Dora]

Anche Leon, nel suo meraviglioso post, aveva ottenuto una notevole riduzione della viremia, a tal punto da poter essere comparato al paziente 5-04, pur senza alcuna infusione. Riguardo ai rimanenti, é un DISASTRO. Adesso possiamo anche dire che hanno monitorato il parametro sbagliato, il setpoint virale e che non conta in realtà, ma perché emerge solo adesso a posteriori?

Sono davvero felice che tu sia andato a rileggerti quell'intervento di Leon, così prezioso per capire quante fesserie a volte i ricercatori abbiano in mente.
Anzitutto, diciamo che Leon la volta che interruppe la terapia per 5 mesi, quando poi ricontrollò la viremia era in una condizione molto migliore di quella del migliore fra i pazienti di Sangamo, perché lui aveva poche decine di copie di virus, cioè più di 2 log al di sotto del suo personale set point e presumibilmente era rimasto lì per tutti i mesi dell'interruzione, mentre la paziente 504 attorno al suo set point c'è rimasta per quasi tutto il tempo, con soltanto quei due prelievi a metà interruzione con VL irrilevabile.
Poi, io non ti so dire perché il set point definito con un intervallo di tolleranza stretto sia preso da Sangamo (ma anche da altri, se ricordi Savarino basava il successo dei macachi di Lourdes proprio sul fatto che il rebound della viremia restava al di sotto al set point) come la soglia che decreta il successo o l'insuccesso.
Immagino ci siano delle ragioni teoriche - oppure si tratta di una convenzione di comodo, basata sul fatto che, statisticamente, quando si interrompe la ART si vede in genere una risalita della viremia fino al livello cui si era assestata prima che la terapia venisse iniziata; quindi se resta al di sotto sei tutto contento e tendi a considerarlo un fenomeno non casuale. Non so, cercherò di approfondire.

Ma sopratutto, e Dora spero che tu mi contraddica, davvero ben tre pazienti su dieci si ritrovano con un virus dual-tropico dopo questa infusione?

C'è la possibilità che il tropismo sia cambiato fra quando i tre sono stati arruolati e quando dovevano infondergli le cellule modificate. Io non so nulla di più rispetto a quanto dice la slide e temo che dovremo aspettare o il prossimo congresso o un articolo per capire se il virus R5/X4 è emerso da solo o se - Dio non voglia! - è stato favorito dalla procedura. Ti posso però dire che nel lavoro che hanno portato a ICAAC 2011, in cui per la prima volta avevano parlato di sei persone cui era stata sospesa la terapia e una di queste era il "Trenton Patient", uno aveva dovuto ricominciare la ART dopo sole 8 settimane di interruzione perché la viremia era alta e un altro avevano dovuto rimetterlo in terapia prima del tempo perché era emerso un virus dual-tropico. Che questo sia un rischio della procedura con SB-728-T, è assodato.

Ora, se tu guardi la situazione dei 10 pazienti eterozigoti Δ32 per come è descritta nella tabella che ho riportato sopra, vedi che erano tutti in una condizione immunologica buona o addirittura ottima, pur dopo anche parecchi anni di infezione (e credo che l'eterozigosi abbia giocato anche qui a loro favore). Credo sia dunque legittimo chiedersi se valeva la pena sottoporsi a questa sperimentazione per ritrovarsi con un virus X4, magari più difficile da gestire. In particolare, immagino che il 24-enne con infezione recente e con 761 CD4 di partenza forse adesso si starà chiedendo chi gliel'ha fatto fare.

[skydrake]

C'è la possibilità che il tropismo sia cambiato fra quando i tre sono stati arruolati e quando dovevano infondergli le cellule modificate. Io non so nulla di più rispetto a quanto dice la slide e temo che dovremo aspettare o il prossimo congresso o un articolo per capire se il virus R5/X4 è emerso da solo o se - Dio non voglia! - è stato favorito dalla procedura.

Spero vivamente che sia cosi, ma io ci vedo la causa-effetto, relazione persino più forte dell'azzeramento del setpoint virale come il paziente 504 (3 pazienti contro 1). Con il ciclofosfamide, il periodo finestra della compresenza dei due tipi di CD4 CCR5- e CCR5+ la situazione dovrebbe migliorare, ma viceversa é destinata a peggiorare con pazienti con già un alto numero di CD4. Finestra di rischio che comunque non si chiuderà mai del tutto, causa la lenta ma continua produzione di CD4 CCR5+ da parte del midollo. A questo punto, l'unica possibilitá di salvezza della Sangamo é qualcosa come il Cenicriviroc, ma esclusivamente contro il CCR2.

La cosa che mi da fastidio é che questo nuovo ostacolo si ripresenterà anche per le emopoietiche modificate.

[Dora]

io ci vedo la causa-effetto, relazione persino più forte dell'azzeramento del setpoint virale come il paziente 504 (3 pazienti contro 1). Con il ciclofosfamide, il periodo finestra della compresenza dei due tipi di CD4 CCR5- e CCR5+ la situazione dovrebbe migliorare, ma viceversa é destinata a peggiorare con pazienti con già un alto numero di CD4. Finestra di rischio che comunque non si chiuderà mai del tutto, causa la lenta ma continua produzione di CD4 CCR5+ da parte del midollo.

Mi chiedo quale sarà la nuova strategia di Sangamo, una volta accertato che le interruzioni terapeutiche non ci restituiscono tanti meravigliosi "Trenton Patients".
Bisognerà guardare con grande attenzione ai risultati del trial sulla ciclofosfamide e coniugarli con la correlazione che è stata stabilita fra diminuzione del reservoir e numero di cellule modificate. Ripensando a quello che Kuritzkes ha fatto con i suoi pazienti a Boston (trapianto di staminali normali + continuazione della ART) e che John Wagner e Michael Verneris hanno appena fatto in Minnesota con il Piccolo Ninja (trapianto di staminali difettive + continuazione della ART), forse una strada potrebbe essere:

• Ipotesi di Dora: condizionamento con Cytoxan + infusione di un numero (molto) maggiore di CD4 modificati + continuazione con la pressione della ART per un periodo ben più lungo dei 2 mesi attuali + interruzione terapeutica

Che ne pensi?

[Dora]

Anche se non c'entra niente con l'HIV, vi segnalo che Sangamo ha pubblicato ieri su Nature un lavoro INCREDIBILE ANCHE SOLO POCO TEMPO FA: la prima dimostrazione della inattivazione di un extra cromosoma nelle cellule staminali di persone con la sindrome di Down (chi ha la sindrome di Down ha una copia in più del cromosoma 21). Mediante ZFN, è stato introdotto in un sito specifico del cromosoma 21 una copia di un gene che normalmente funziona per *spegnere* la copia extra del cromosoma X nelle donne.



Siamo ancora lontani dal poter applicare tutto questo in clinica, ma resta un passo avanti enorme.



- Comunicato stampa: Sangamo BioSciences Announces Publication of First Demonstration of Inactivation of Extra Chromosome Responsible for Down Syndrome;
- Commento: Scientists inactivate extra chromosome in stem cells from people with Down's syndrome.